实践掠影

一、   实验（实训）教学内容及学时分配

（一）教学学时分配

（二）实验（实训）教学内容

实验（实训）项目一：MS培养基的配制         

【目的】掌握植物培养基的配制方法

【原理】MS培养基是植物组织培养最常用的培养基。

【主要仪器设备及耗材】电子天平、酸度计、电炉、高压灭菌锅

【内容】按培养基配方配制配制培养基

【方法】配制培养基

实验（实训）项目二： 初代培养       

【目的】掌握组织培养技术流程

【原理】植物细胞的全能性

【主要仪器设备及耗材】超净工作台、光照培养箱、显微镜

【内容】取材、消毒、接种、培养

【方法】选取特定植物材料的幼嫩部分进行初代培养

实验（实训）项目三：芽分化培养          

【目的】进行芽分化培养诱导不定芽的形成

【原理】高细胞分裂和生长素比例利于芽的形成

【主要仪器设备及耗材】电子天平、酸度计、高压灭菌锅、超净工作台、光照培养箱

【内容】配制分化培养基，转接，培养

【方法】将愈伤组织转入分化培养基培养

实验（实训）项目四：生根培养          

【目的】诱导不定根的形成

【原理】低细胞分裂和生长素比例利于根的形成

【主要仪器设备及耗材】电子天平、酸度计、高压灭菌锅、超净工作台、光照培养箱

【内容】配制生根培养基，转接，培养

【方法】将不定芽转入生根培养基培养

实验（实训）项目五：  传代培养        

【目的】学习传代培养技术

【原理】传代培养利于增殖细胞和药效研究

【主要仪器设备及耗材】电子天平、酸度计、高压灭菌锅、超净工作台、培养箱

【内容】配制培养基，消化细胞，分瓶培养

【方法】用胰蛋白酶消化细胞分瓶培养

实验（实训）项目六：  生长曲线的测定        

【目的】掌握生长曲线的测定方法

【原理】细胞生长呈S曲线

【主要仪器设备及耗材】电子天平、酸度计、高压灭菌锅、超净工作台、培养箱

【内容】转接细胞到培养板，测定细胞活性和密度

【方法】转接细胞到培养板，每24小时测定一次细胞密度，连续测定7天

实验（实训）项目七：   细胞的冻存       

【目的】学习细胞冻存方法

【原理】DMSO抗冻剂能低温保存细胞

【主要仪器设备及耗材】电子天平、酸度计、高压灭菌锅、超净工作台、培养箱、-70℃冰箱

【内容】冻存细胞

【方法】细胞传代培养，胰酶消化后加入冻存培养基，逐级降温冻存细胞，转入-70℃冰箱保存

实验（实训）项目八：    细胞的复苏      

【目的】学习细胞复苏技术

【原理】慢冻快溶复苏细胞

【主要仪器设备及耗材】电子天平、水浴锅、超净工作台、培养箱、-70℃冰箱，倒置显微镜

【实验（实训）内容】从-70℃冰箱复苏细胞

【实验（实训）方法】从-70℃冰箱取出细胞，37度水浴迅速溶化，转入超净台换普通培养基，培养箱培养，倒置显微镜观察细胞贴壁，36小时左右测定活性。

二、   测评方式

1.预习（ 10 %）

2.实验（实训）操作（ 60 %）

3.实验（实训）报告（30  %）

三、   实验（实训）指导书及参考资料

1. 钱洁，《细胞工程实验指导》，清华大学出版社，2015

2. 王爱华，《细胞工程实验》，高等教育出版社，2017

3.李志勇，《细胞工程实验教程》,高等教育出版社，2017